Кызыт тендан браузерыште Javascript локтылалтын. Javascript локтылалтме годым тиде веб-сайтын южо функцийже пашам ок ыште.
Тендан ойыртемалтше данныйда да ойыртемалтше наркотик дене регистрацийым эртыза, ме тендан пуымо информацийдам мемнан кумда базыште улшо статья-влак дене келыштараш тӱҥалына да вигак PDF-копийым электрон почто дене колтена.
Ban-Lan-Gen гранул-влак чыве-влакын декстран натрий сульфат дене тарватыме хронический рецидив колитыштым луштарат, кӧргӧ микробиотым вашталтат да кӧргӧ SCFA Derived-GLP-1 производствым пӧртылтат
Цзяо Пэн,1-3,*Ли Си,4,*Чжэн Лин,3,5 Дуань Лифан,1 Гао Чжэнсянь,2,5 Дьэху,1 Ли Цзе,6 Ли Сяофэн,6 Шэнь Сянчунь,5 Сяо Хайтао21Пекин университетын Шэньчжэнь больницысе фармаций пӧлкаже, Шэньчжэнь, Китай Калык Республик-влак; 2Шэньчжэнь университетын тазалыкым аралыме науко рӱдерже фармаций школ, Шэньчжэнь, Китай Калык Республик; 3Гуйчжоу медицине университетын инженер технологий шымлыме рӱдерже этнический медицине да йӱла китай медицине вияҥмаш да кучылтмо образований министерстве, Гуйчжоу провинцийыште тӱҥ лабораторий фармацевтика, Гуйчжоу медицине университет , Гуйян, Китай Калык Республик; 4 Гастроэнтерологий пӧлка, Пекин университетын Шэньчжэнь больницыже, Шэньчжэнь, Китай Калык Республик; 5 фармаций школ, Гуйчжоу медицине университет, эмлыме кушкыл-влакын функцийышт да кучылтмашышт шотышто кугыжаныш тӱҥ лабораторий, Гуйян; 6 Лабораторий медицине пӧлка, Пекинский университет Шэньчжэнь больницыште, Шэньчжэнь, Китай [email protected] Шэнь Сянчунь, фармаций школ, Гуйчжоу медицине университет, Гуйчжоу, Китай Калык Республик, 550004, Email [email protected] Цель: GLP-1 негызеш терапий — тиде у йӧн, тудо кӧргӧ черым эмла. (BLG) гранул-влак — палыме антивирусный ТКМ формулировко, тудо тӱрлӧ воспалительный состоянийым эмлыме годым противовоспалительный активностьым ончыкта. Туге гынат, тудын колитлан противовоспалительный эффектыже да тудын действийжын механизмыже эше раш огыл.МЕТОД-ВЛАК: Декстран натрий сульфат (ДСС) дене тарватыме хронический колпсис реактивностьым пеҥгыдемдаш. индекс-влак, гистологический маркер-влак сусыргымаш, да провоспалительный цитокин кӱкшытыштӧ ыштыме, аралыме эффектым аклаш манын, BLG.Влиянийже BLG кӧргӧ микробиота да кӧргӧ характеристикым пуэныт, шӧртньӧ GLP-1 кӱкшытыштӧ да кишкыже Gcg, GPR41, да GRP43 экспрессий, кӧргӧ микробиота состав, фекал SCFA кӱкшытыштӧ да первичный чыве гыч лекше GLP-1 кишкыже эпителиальный клетке-влак SCFA-дериватлыме GLP-1 производствым.Леведыш: BLG эмлымаш ятырлан иземден кап нелытым йомдарен, DAI, кишкыже кӱчыкемдаш, кишкыже ткань локтылалтмаш, да провоспалительный цитокин кӱкшытыштӧ TNF-α, IL-1β, да IL-6 кишкыже тканьыште.Тылеч посна, BLG эмлымаш ятырлан пӧртылтен кертеш, GPR14 GPR14. да GRP43 экспрессий да GLP-1 кӱкшытыштӧ колит чыве-влакын, да SCFA-производящий бактерий-влакым кугемдыме дене, кузе тыгай Akkermansia да Prevotellaceae_UCG-001, да бактерий-влакын шуко улмыштым иземдыме дене, кузе тыгай Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-14, Imonates Bactinis Bactinis. Тылеч посна, BLG эмлымаш колит дене черланыше чыве-влакын фекалийыштышт SCFA-влакын кӱкшытыштым ятырлан кугемден кертеш. Тиде жапыште, in vitro эксперимент-влак тыгак ончыктеныт, мом BLG-обрабатыватлыме чыве-влакын фекал экстрактышт кугу кумылаҥден кертеш тӱҥ изи мышиный кишкыже эпителиальный клетке-влак секретировать GLP-1. Иктешлымаш: Тиде лектыш-влак ончыктат, молан манаш гын, BLG анти-колит эффектым пуа. BLG терапий семын вияҥдаш йӧн уло, кеч ик ужашыштыже кӧргӧ микробиотым модулироватлыме да кӧргӧ SCFA-дериватлыме GLP-1 производствым пӧртылтымӧ дене Хронический рецидив колитлан перспективный препарат-влак. Кӱлешан мут-влак: колит, Ban-Lan-Gen гранул, кӧргӧ микробиота, кӱчык шинчыр коя кислота, GLP-1
Язвенный колит (ЯК) — кужу жаплан шуйнышо воспалительный чер, кӧргӧ да коваште, тудо угыч диарея, мӱшкыр йӱлалтенам, нелытым йомдарен, да слизистой вӱрым йӱлалтенам.1 Пытартыш жапыште, ЯК шарлыме кугемын, ончычсо шагал эллаште, тыгак китайыште, кумдан палыме лийме дене касвел илыш-йӱла кугемеш 22. калык тазалыклан кугу проблемым луктеш да пациент-влакын пашам ыштен кертмыштлан да илыш качествыштлан кугу эҥгекым ышта. Палемдыман, УК-н патогенезше шукыж годым раш огыл кодеш, но тыглай еҥ-влак тыгай улыт: генетике, йырым-йырысе среда фактор-влак, кӧргӧ микробиота да иммунный системе чыланат УК-н вияҥмыжлан полшат. ремиссийым тарваташ да арален кодаш, слизистой пареммашым кумылаҥдаш да рецидивым иземдаш.Классик эмлымаш-влак коклаште аминосалицилат, кортикостероид, иммунодепрессант да биологический препарат-влак улыт. Туге гынат, нине препарат-влак тӱрлӧ могырым эҥгеклан кӧра кӱлеш эффектым шуктен огыт керт.4 Шукерте огыл шуко шымлымаш ончыкта, йӱла медицине (МТК) кугу изи токсичность дене UC-ым кораҥдаш полшышо потенциал, тидын дене у TCM терапийым вияҥдымаш UC.5-7-лан перспективный эмлыме стратегийлан шотлалтеш
Banlangen Granules (BLG) — йӱла китай медицине ямдылыме, тудо банланген рӱдаҥше вӱд экстракт гыч ышталтын.8 Антивирусный пайдалыкше деч посна, BLG тӱрлӧ воспалительный состоянийым эмлыме годым противовоспалительный активностьым ончыкта.9,10 Тидын деч моло, глюкозинолат-влак (R,S-гоитрин, эпипробин да глюкозид да изолироватлыме лийыныт вӱдышӧ экстракт гыч палемдыме Radix isatidis) да нуклеозид-влак (гипоксантин, аденозин, уридин да гуанозин) да индиго алкалоид-влак, кузе тыгай индиго да индирубин.11,12 Ончычсо шымлымаш-влак сайын ончыктеныт, молан манаш гын, аденозин, уридин да индирубин соединений-влак кололит тӱрлӧ янлык модельыште виян антиколит эффектым ончыктат. Туге гынат, колит годым BLG-н пайдалыкшым аклаш нимогай доказательстве негызеш шымлымашым эртарыме огыл. Кызытсе шымлымашыште ме C57BL/6 чыве-влакын декстран натрий сульфат (DSS) дене тарватыме хронический рецидив колитлан BLG-н аралыме эффектыжым шымленна да пален нална: BLG-н пероральный администрацийже DSS-ын хронический рецидив дене тарватыме чыве-влакын рецидив колитыштым ятырлан шагалемден Воспаление, тудын регуляторный механизмже-влак кӧргӧ микробиотым модулироватлыме да кӧргӧ гыч лекше глюкагон гай пептид-1 (ГЛП-1) производствым пӧртылтымӧ дене кылдалтыныт.
BLG гранулым (сакыр деч посна, NMPA-пеҥгыдемдыме Z11020357; Пекин Tongrentang технологийым вияҥдыме Co., Ltd., Пекин, Китай; партий номер: 20110966) аптекыште налме. MP Biologicals (Санта-Ана, США).Сульфасалазин (SASP) (≥ 98% арулык), гематоксилин да эозин Sigma-Aldrich (Сент-Луис, MO, США) гыч налме. Чыве TNF-α, IL-1β да IL-6 luminex Elisa анализ комплект-влакым R&D Systems (MNacetic Mineacetic, USA) гыч налме. пропионовый кислота, да масляный кислота налме деч Aladdin Industries (Шанхай, Китай).2-Этилмасляный кислота налме деч Merck KGaA (Дармштадт, Германий).
6-8 арня ийготан пӧръеҥ C57BL/6 чыве-влакым (кап нелытше 18-22 г) Пекин Wetahe Laboratory Animal Technology Co., Ltd. (Пекин, Китай) гыч налыныт да 22 ± 2 °C температурышто 12 шагат волгыдо/пычкемыш цикл дене чыве-влаклан стандарт йӱмӧ вӱд дене пукшеныт. арня у средалан келыштараш манын. Чыве-влакым вара случайный йӧн дене куд тӱшкалан шеледеныт: контроль тӱшка, DSS модель тӱшка, SASP-обрабатыватлыме тӱшка (200 мг/кг, пероральный) да BLG-обрабатыватлыме группо (1 г/кг, пероральный). 1А рис. ончыктымо семын, мемнан ончычсо шымлымаш почеш, экспериментальный хронический рецидив колит кум циклыште DSS 18% жапыште тарватен. 5 кече, вара 7 кече дистиллированный вӱд дене, мемнан ончычсо шымлымаш почеш.18 SASP да BLG дене эмлыме группышто чыве-влакым SASP да BLG дене обрабатыватленыт, кажне кечын 0 кече гыч тӱҥалын. Ончылгоч эртарыме эксперимент почеш, BLG-н дозым 1 г/кг шынденыт. Тиде жапыште SASP-ын дозым 20/кг/мг почеш шынденыт литературым.4 Контроль да DSS модель группо-влак эксперимент мучко икгай вӱдым налыныт.
1-ше рис. BLG чыве-влакын DSS-индуцированный хронический рецидив колитыштым саемда. (А) хронический рецидивный колитын экспериментальный дизайнже да эмлымашыже, (В) кап нелытым вашталтыме, (С) чер активность индекс (DAI) балл, (D) кок кишкыже кужыт, (Е) кок кишкыже представительный образ, (F) H&E окрашивание Колон магнификаций, (G балл.Данный-влак кокла шот дене ± SEM (n = 6) семын ончыкталтыт.##p < 0,01 але ###p < 0,001 контроль (Con) группо дене таҥастарымаште; *p < 0,05 але **p < 0,01 але ***p < 0,001 DSS группо дене таҥастарымаште.
Кап нелытым, ӱпым да ӱпым кажне кечын возен налме. Чер активность индекс (ЧАИ) рашемдыме, кап нелытым, ӱпым ыштыме да ӱпым лукмо баллым ушен, кузе ончыч каласыме.19 Эксперимент мучаште чыла чыве-влакым эвтаназийым ыштеныт да умбакыже экспериментлан вӱрым, ӱпым да кок кишкыжым погеныт.
Кок кишкыже тканьым формалин дене пеҥгыдемдыме да парафин дене шыҥдарыме. 5 микрон ужаш-влакым ыштеныт да гематоксилин-эозин (H&E) дене чиялтеныт, вара сокыреныт да ончычсо семынак шотленыт.19
Тризол реагент дене (Invitrogen, Carlsbad, CA) кок кишкыже тканьын чумыр РНК-жым луктыныт, вара обратный транскриптаза дене кДНК-м луктыныт (TaKaRa, Kusatsu, Shiga, Japan). Количественный ПЦР-ым SYBR Green Master (Roche, Basel, Switzerland) дене реальный жапыште ПЦР системым кучылтын эртареныт да ПЦР ген-транскрипт-влакым нормализоватленыт. данный-влакым 2-ΔΔCT йӧн дене лончыленыт. Ген праймер радам-влак 1-ше таблицыште ончыкталтыныт.
Тӱҥалтыш чыве кишкыже эпителиальный клетке-влакым ойырен налмаш да культурым ончычсо семынак эртареныт.20 Кӱчыкын, 6-8 арня ийготан чыве-влакын кишкыже-влакым эн ончыч шейный дислокаций дене надыр деч вара луктыныт, вара кужун почыныт, Хэнкс балансированный шӧр раствор дене (HBSS, кальций да магний деч посна) 50 мм изирак ӱй дене обрабатыватленыт. лаштык-влак. Варажым ткань-влакым 0,4 мг/мл коллагеназа XI (Сигма, Пул, Великобританий) дене эрыкан ДМЭМ средаште йӱлалтеныт да 300 xg 5 минут жапыште пӧлем температур годым центрифугироватленыт. ДМЭМ средаште пеллетым угыч суспендироватленыт (10% ӱшкыж ӱй дене ешареныт, 10% единице/мл да пеллин 100 мкг/мл стрептомицин) 37 °C температурышто да нейлон тор гоч эртат (пор кугыт ~250 мкм). Колонка эпителиальный клетке-влакын аликвотыштым стекло йымалне тарелкыш пыштеныт да уксус кислота, пропион кислота, масляный кислота, чыве экстракт дене 37 °C шагат жапыште инкубироватьленыт 5% CO2.
Кок кишкыже тканьым PBS дене гомогенизироватлыме, да кишкыже тканьыште цитокин IL-6, TNF-α да IL-1β кӱкшытым luminex ELISA анализ комплект-влакым кучылтын палемдыме (R&D системе, Миннеаполис, МН, США). Тыгак GLP-1 кӱкшытым первичный эпителиальный клетке-влакын шӧрыштышт да культур средаштышт рашемдыме ИФА-комплект (Bioswamp, Ухань, Китай) производительын инструкцийже почеш.
ДНК-м фекалий гыч чумыр ДНК-м ДНК-м лукмо комплект дене луктыныт (Тяньген, Китай). ДНК-н качествыжым да чотшым 260 нм/280 нм да 260 нм/230 нм коэффициент дене висыме. Варажым, кажне лукмо ДНК-м шаблон семын кучылтын, ойыртемалтше праймер-влакым 338F (ACCCG) да GCAGGA86 (GGACTACHVGGGTWTCTAAT) тӱрлӧ регионышто 16S рРНК генын V3-V4 регионжым амплификацийлан кучылталтше.ПЦР продукт-влакым QIAquick Gel Extraction Kit (QIAGEN, Германий) дене эрыктеныт, чын жапыште ПЦР дене шотленыт да IlluminaMiseq PE300 sequencing платформым кучылтын секвенироватьленыт (FIor CA, USA). биоинформатике анализ, данный-влакым обрабатыватлымаш ончычсо увертарыме протокол-влак почеш эртаралтын.21,22 Кӱчыкын каласаш гын, сырьевой экспресс-файл-влакым фильтроватлаш Cutadapt (V1.9.1) кучылтман. OTU-влакым UPARSE (7.0.1001 версий) дене 97% икгайлык чек дене чумыреныт, а UCHIME-ым химер классификацийым да коммуникацийым кораҥдаш кучылтыныт. SILVA рибосомный РНК ген-влакын базышт негызеш RDP классификатор (http://rdp.cme.msu.edu/) дене ыштыме лийыныт.
Кӱчык шинчыр ӱй кислота-влакын кӱкшытыштым (уксус кислота, пропион кислота да масляный кислота) ончычсо семынак висыме, кузе ончыч Тао да молат сӱретленыт, южо вашталтыш дене.23 Кӱчыкын, 100 мг фекалийым ондак 0,4 мл деионизированный вӱдыштӧ, вара 0,1 мл 50% серный кислота да 50 мл серный кислота дене висыме. 2-этилмасляный кислота (внутренний стандарт), вара гомогенизировать да 4°C шокшо. Центрифугироватлаш 12,000 об/мин 15 минут жапыште C. Супернатант 0,5 мл эфир дене луктын да анализлан ГХ-ш пуртеныт. Газ хроматографий (ГХ) анализлан образец-влакым ГХ-2010 Плюс газ хроматограф (Shimadzu, Inc) дене лончыленыт, тудо тул детектор дене пойдаралтын. (FID). Ойыркалымаш ZKAT-624 колонко дене шукталтеш, 30 м × 0,53 мм × 0,3 мкм (Lanzhou Zhongke Antai Analytical Technology Co., Ltd., Китай). Данный-влакым ГХ раствор программе полшымо дене налыныт (Shimadzu, Inc.). Шеледымашын коэффициентше 10:10 лийын: азот несущий, а газ несущий лийын. йогын 6 мл/мин лийын. Инъекций кугытшо 1 мкл лийын. Инжектор ден детекторын температуржо 300°C лийын. Пече температур 140°C 13,5 минут жапыште кучен, вара 120°C/мин писылык дене 250°C марте кугемден; температур 5 минут жапыште кученыт.
Данный-влак кокла шот дене ± кокла шот дене стандарт йоҥылыш (SEM) семын ончыкталтыт. Данный-влакын значенийыштым ик могырым ANOVA дене акленыт, вара Дункан шуко диапазонан тест дене акленыт. Чыла шотлымо годым GraphPad Prism 5.0 программе (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA) кучылталтше да p < 0,05 статистически значимыйлан шотлалтеш.
Палыме, молан манаш гын, UC — тиде хронический рецидив колит чер, тудын дене неле мӱшкыр йӱла, диарея да вӱр йоген. Сандене, DSS-индуцированный хронический рецидив колит чыве-влакын BLG-н антиколит пайдалыкшым аклаш ыштыме (рис. 1А). DAI, да тиде вашталтыш-влак 24 кече гыч BLG эмлыме деч вара ятырлан вашталтыныт (рис. 1В да С). Колон кӱчыкеммаш — UC-н кӱлешан палыже. 1D да Е рислаште ончыктымо семын, DSS-ым налше чыве-влакын кок кишкышт кужытшо ятырлан кӱчыкемын, но BLG эмлыме дене эрыкан лийын.Варажым, гистопатологический анализым эртарыме, манын аклаш воспаление.H&E чиялтыме сӱрет да патологический балл-влак ончыктеныт, мом DSS администраций ятырлан пудыртен колониальный архитектур да лектышыш шуын крипт пудыртымаш, а BLG эмлымаш ятырлан иземден крипт пудыртымаш да патологический баллым (рис 1F да G).Палемдыман, аралыме эффект BLG дозым 1 г/Кг SASP20 доз дене таҥастарымаште лийын мг/кг.Чылаже, тиде лектыш-влак ончыктат, молан манаш гын, BLG чыве-влакын DSS-индуцированный хронический рецидив колит нелылыкым иземдаш пайдале.
ТНФ-α, IL-1β да IL-6 кӱлешан воспалительный маркер-влак улыт, кӧргӧ воспаление. Кузе ончыктымо рис 2А, DSS индукций ген экспрессий TNF-α, IL-1β да IL-6 ген экспрессий контроль группо дене таҥастарымаште ятырлан кугемдаш.Администраций BLG ятырлан вашталтен кертеш тиде DSS-медиировать вашталтыш, ме кучылталтше ELISA кӱкшытыштӧ рашемдаш. воспалительный цитокин-влак TNF-α, IL-1β, да IL-6 кӧргӧ тканьыште.Леведыш тыгак ончыктен, молан манаш гын, кӧргӧ кӱкшытыштӧ TNF-α, IL-1β, да IL-6 ятырлан кугемын чыве дене эмлыме DSS, а BLG эмлыме тиде кугеммашым луштараш (рис 2В).
рис 2 BLG тормозитлаш ген экспрессий да производствым провоспалительный цитокин-влак TNF-α, IL-1β да IL-6 кок кишкыже DSS-обрабатыватлыше чыве.(А) Колонический ген экспрессий TNF-α, IL-1β да IL-6; (B) кӧргӧ белок кӱкшытыштӧ TNF-α, IL-1β да IL-6. Данный-влак кокла шот дене ± SEM (n = 4–6).#p < 0.05 але ##p < 0.01 але ###p < 0.001 ваштареш контроль (Con) группо; *p < 0,05 але **p < 0,01 DSS группо дене таҥастарымаште.
Кӧргӧ дисбиоз UC патогенезыште кӱлешан.24 BLG DSS-обрабатыватлыме чыве-влакын кӧргӧ микробиотыштым модулироватла мо манын шымлаш манын, 16S рРНК секвенирование кӧргӧ содержанийын бактерий сообществыжым лончылаш эртаралтын.Венн диаграмме ончыкта, кум тӱшка 385 OTU-м пайлат.A, кажне тӱшка икгай жапыште шкешотан лийын (рис. OTU). 3А).Умбакыже, 3В да С рисыште ончыктымо Chao1 индекс ден Шеннон индекс ончыктеныт: BLG дене эмлыме чыве-влакын кӧргӧ микробиотын общине тӱрлӧлыкышт шагалемын, вет BLG дене эмлыме группышто Шеннон индекс ятырлан шагалемын. группо-влак да ончыктен, мом DSS-обрабатыватлыме чыве-влакын общине структурышт BLG эмлыме деч вара раш ойырен (рис. 3D да E). Тиде данный-влак ончыктат, BLG эмлыме DSS-индуцированный колит дене черланыше чыве-влакын общине структурыштлан ятырлан эҥгекым ыштен.
3-шо рис. BLG DSS-индуцированный колит дене черланыше чыве-влакын кӧргӧ микробиота тӱрлӧ улмыштым вашталта. (А) OTU-н Венн диаграммыже, (B) Chao1 индекс, (C) Шеннонын поянлык индексше, (D) OTU-н тӱҥ компонент анализ (PCA) балл графикше, (E) OTU тӱҥ координат анализ балл (PCA) рис. Данный-влак кокла шот дене ± SEM (n = 6) семын ончыкталтыт.**p < 0,01 vs DSS группо.
Фекальный микробиотын ойыртемалтше вашталтышыжым аклаш манын, ме чыла таксономический кӱкшытыштӧ кӧргӧ микробиотын составшым лончыленна. 4А рис. ончыктымо семын, чыла тӱшкаште тӱҥ тип-влак Firmicutes ден Bacteroidetes лийыныт, нунын деч вара Verrucomicrobia. Firmicutes ден Firmicutes/Bacteroidetes-влакын относительный чотышт фекалыште ятырлан кугемын DSS-обрабатыватлыме чыве-влакын микробный общинышт контроль чыве дене таҥастарымаште, да тиде вашталтыш-влак BLG эмлыме деч вара ятырлан вашталтыныт. В частности, BLG обрабатыватлыме DSS-индуцированный колит дене черланыше чыве-влакын фекалийыштышт Verrucobacterium-ын относительный шуко улмыжым ятырлан кугемден. Muribaculaceae, Akkermansiaceae, Ruminococcaceae да Prevotellaceae (рис. 4В). DSS группо дене таҥастарымаште, BLG-н пытыме Akkermansiaceae-влакын шуко улмыштым кугемден, но Lachnospiraceae ден Ruminococcaceae-влакын шуко улмыштым иземден. Lachnospira_NK4A136_group, Akkermansia да Prevotellaceae_UCG-001 (рис. 4С) дене озалана. Тиде муын тыгак ончыктен, мом BLG эмлымаш эффектно вашталтен микробиота дисбаланс DSS задачым вашештен, Eubacterium_xylalanophilum_group иземмаш дене палемдалтын, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas да Oscillibacter, да Akkermansia да Prevotellaceae_UCG-001 кугеммаш.
рис 4 BLG вашталта кӧргӧ микробиота шуко DSS-индуцированный колит чыве.(А) шуко кӧргӧ микробиота тип кӱкшытыштӧ; (B) еш кӱкшытыштӧ кӧргӧ микробиотын шуко улмыжо; (C) родо-тукым кӱкшытыштӧ кӧргӧ микробиотын шуко улмыжо. Данный-влак кокла шот дене ± SEM (n = 6) семын ончыкталтыт.#p < 0,05 але ###p < 0,001 контроль (Con) группо дене таҥастарымаште; *p < 0,05 але **p < 0,01 але ***p < 0,001 DSS группо дене таҥастарымаште.
Шотыш налын, кӱчык шинчыр жирный кислота-влак (SCFAs) тӱҥ метаболит Akkermansia да Prevotellaceae_UCG-001, а ацетат, пропионат да бутират эн шуко SCFAs кӧргӧ лумен, 25-27 ме эше мемнан шымлымашыште.Кузе рис ончыктымо 5, фекалий, пропионат, но пропиат концентраций DSS-обрабатыватлыме группышто ятырлан шагалемыныт, а BLG эмлымаш тиде иземмашым шукыж годым локтыл кертын.
Рисункыште 5. BLG DSS-индуцированный колит дене черланыше чыве-влакын фекалийыштышт SCFA-влакын кӱкшытыштым кугемда.(А) фекалийыште уксус кислота содержаний; (B) пропионовый кислота содержанийже фекалийыште; (C) масляный кислота содержанийже фекалийыште. Данный-влак кокла шот дене ± SEM (n = 6).#p < 0.05 але ##p < 0.01 vs контроль (Con) группо; *p < 0,05 але **p < 0,01 DSS группо дене таҥастарымаште.
Умбакыже ме родо-тукым кӱкшытан дифференциальный SCFA ден фекал микробиота коклаште Пирсон корреляций коэффициентым шотлен луктынна. 6-шо рисыште ончыктымо семын, Аккермансия пропионовый кислота (Пирсон = 0,4866) да масляный кислота (Пирсон = 0,6192) ыштен лукмо дене сай корреляций лийын. Энтеромонаст ден Оциллокост коктынат отрицательно лийыныт. ацетат ыштен лукмаш дене кылдалтын, Пирсон коэффициент дене 0,4709 да 0,5104, шот дене. Тыгак Ruminococcaceae_UCG-014 пропионовый кислота (Пирсон = 0,4508) да масляный кислота (Пирсон = 2084) ыштен лукмо дене отрицательно кылдалтын.
Рисункыште 6 Пирсон корреляций анализ коклаште дифференциальный SCFAs да кӧргӧ микроб-влак.(А) Энтеромонас уксус кислота дене; (B) уксус кислота дене контузий бацилла; (C) Аккермансия пропионовый кислота дене таҥастарымаште; (D) Ruminococcus_UCG-014 пропионовый кислота дене; (Е) Аккермансия масляный кислота дене; (F) ) Руминококк _UCG-014 масляный кислота дене.
Глюкагон гай пептид-1 (GLP-1) — проглюкагонын (Gcg) противовоспалительный свойствыж дене клетке типлан келшыше посттрансляционный продукт.28 7-ше рисыште ончыктымо семын, DSS Gcg мРНК экспрессийыште ятырлан иземмашым тарватен. Колон да BLG эмлымаш DSS-ын Gcg иземмыжым контроль группо дене таҥастарымаште ятырлан вашталтен кертеш (рис. 7А).Тиде жапыште, кӱкшытыштӧ GLP-1 шӧртньӧ DSS-обрабатыватлыме группышто ятырлан иземын, да BLG эмлымаш тиде иземмашым кугу чаракым ыштен кертеш (рис. 7В).Вет кӱчык шинчыр жирный кислота-влак GLP-1 секрецийым кумылаҥден кертыт гоч G-белок дене кылдалтше рецептор 43 (GRP43) да GRP43-протеин рецептор (14) активация, ме тыгак шымлен GPR41 да GRP43 колит чыве-влакын кӧргӧ да пален налме, мом кӧргӧ мРНК экспрессий GRP43 да GPR41 DSS ӱчашымаш деч вара ятырлан шагалемын, да BLG эмлымаш тиде иземмашым пайдалын утарен кертеш (рис. 7С да D).
7-ше рис. BLG DSS дене эмлыме чыве-влакын GLP-1 кӱкшытыштым да Gcg, GPR41 да GRP43 мРНК экспрессийым кугемда. (А) Gcg мРНК экспрессий кӧргӧ тканьыште; (B) GLP-1 кӱкшытыштӧ шӧртньӧ; (C) GPR41 мРНК экспрессий кок кишкыже тканьыште; (D) GPR43 мРНК экспрессий кок кишкыже тканьыште. Данный-влак кокла шот дене ± SEM (n = 5–6).#p < 0.05 але ##p < 0.01 ваштареш контроль (Con) группо; *p < 0,05 DSS группо дене таҥастарымаште.
BLG эмлыме деч вара DSS-обрабатыватлыме чыве-влакын GLP-1 кӱкшытыштым, коваште Gcg мРНК экспрессийыштым да фекал SCFA кӱкшытыштым кугемдаш лиеш, сандене ме умбакыже ацетат, пропионат да бутират, тыгак контроль (F-Con), DSS колит (F-Con) -DSS) да BLG-обрабатыватлыме колит (F-Con) чыве-влакын GLP-1 тӱҥ чыве кӧргӧ эпителиальный клетке-влак гыч. 8А рис. ончыктымо семын, 2 мМ уксус кислота, пропионовый кислота да масляный кислота дене обрабатыватлыме тӱҥ чыве кӧргӧ эпителиальный клетке-влак, шот дене, GLP-1 лукмашым ятырлан кумылаҥденыт, ончычсо шымлымаш дене келшен толеш.29,30 Тыгак чыла FDSCon, FDS, да FG-equivalent ( 0,25 г фекалий) тӱҥ чыве кӧргӧ эпителиальный клетке гыч GLP-1 лекмашым чот кумылаҥден. Палемдыман, F-DSS дене эмлыме тӱҥ чыве кӧргӧ эпителиальный клетке-влакын лукмо GLP-1 кугытшо F-Con да F-BLG дене эмлыме тӱҥ чыве эпителиальный клетке-влак деч ятырлан шагалрак лийын (8-ше рис. В данный-влак). BLG эмлымаш кӧргӧ SCFA-дериватлыме GLP-1 производствым ятырлан пӧртылтен.
8-ше рис. BLG-дериватлыме SCFA тӱҥ чыве кӧргӧ эпителиальный клетке гыч GLP-1 лукмашым кумылаҥда.(А) Уксус кислота, пропионовый кислота да масляный кислота первичный чыве кӧргӧ эпителиальный клетке гыч GLP-1 лекмашым кумылаҥдат; (B) фекал экстракт F-Con, F-DSS да F-BLG кумылаҥден первичный мышиный коваште эпителиальный клетке-влак Количество GLP-1 луктын.Аликвота коваште эпителиальный клетке-влак стакан йымалне петри тарелкыште вераҥдыме да 2 мМ уксус кислота, пропионовый кислота, пропиорийный кислота, но фекалный экстракт дене обрабатыватлалтеш, F-Con F-DSS, да F-BLG (0,25 г фекалийлан эквивалент), шот дене. 2 шагат 37°C, 5% CO2, шот дене. Тӱҥ чыве кӧргӧ эпителиальный клетке гыч лекше GLP-1 кугытшым ИФА дене палемдыме. Данный-влак кокла шот дене ± SEM (n = 3) семын ончыкталтыт.#p < 0,05 але ##p < 0,01 vs. blank or F-C on; *p < 0,05 F-DSS ваштареш.
Кӱчыкемдыме мут-влак: Туз, уксус кислота; Про, пропионовый кислота; туге гынат, ӱй кислота; F-Con, контрольный чыве-влакын фекал экстрактышт; F-DSS, колит дене черланыше чыве-влакын фекал экстрактышт; F-BLG, BLG дене эмлыме кок кишкыже воспалительный чыве-влакын фекал экстрактышт гыч.
Тӱнямбал тазалыкым аралыме организацийын рефрактерный чер семын палемдыме UC тӱнямбал лӱдыкшӧ лийын; туге гынат, черым ончылгоч пален налме, профилактике да эмлыме йӧн-влак эше шагал улыт. Сандене, UC-лан у лӱдыкшыдымӧ да пайдале эмлыме стратегий-влакым шымлаш да вияҥдаш вашке кӱлеш. Йӱла китай медицине препарат-влак перспективный вариант улыт, вет шуко йӱла китай медицине препарат-влак UC-м эмлыме годым курымла мучко пайдале улыт да нуно чыланат биологический органике да пӱртӱс материалым, утларакше айдеме да янлыклан лӱдыкшыдымӧ улыт.31,32 Тиде шымлымаш лӱдыкшыдымӧ да пайдале йӱла китай медицине ямдылыме йӧным кычалаш да тудын механизмжым шымлаш шонен.BLG — тиде кумдан палыме китай шудо формулым, кудым гриппым эмлаш кучылтыт. йӱла китай медицине продукт гыч тыгаяк сырьевой BLG, айдеме да янлык-влакын UC эмлыме годым кугу пайдалыкым ончыкта.4,34 Туге гынат, анти-колит эффект BLG да тудын эффектше Механизм раш огыл.Кызытсе шымлымашыште, мемнан лектыш ончыкта, мом BLG пайдалын луштара DSS-индуцированный colonic воспаление, кудыжо дене кылдалтше модулирование кишкыже микробиота да кӧргӧ гыч лекше GLP-1 производствым пӧртылташ.
Палыме, молан манаш гын, UC тыглай клинике ойыртем дене рецидив жап дене палемдалтеш, мутлан, нелытым йомдарымаш, диарея, ректальный вӱр йогымаш, да кумда кӧргӧ лышташ локтылалтмаш.35 Тыге, хронический рецидив колит кум цикл 1,8% DSS вич кече жапыште, вара шым кече вӱдым йӱмӧ дене эртаралтын. 1В, вашталтше нелытым йомдарымаш да DAI баллым ончыктеныт сеҥымаш индукций хронический рецидив колит.Чыве-влак группышто эмлыме BLG 8 кече гыч ӱлыкӧ нӧлталтше тӧрланымашым ончыктен, тудо 24 кече деч ятырлан ойыртемалтын.Тыгаяк вашталтышым тыгак DAI баллым эскереныт, клинике саемдаш темлена шотышто саемдаш колит да воспалительный состоянийыште воспалительный. кок кишкыже кужытшо, кишкыже тканьын локтылалтмыже, ген экспрессий да кишкыже тканьыште провоспалительный цитокин-влакын TNF-α, IL-1β, да IL-6 лектышышт тыгак BLG эмлыме деч вара ятырлан саемденыт. Чыла тидым раш ончыктат: BLG чыве-влакын хронический рецидив колитыштым эмлымаште пайдале.
Кузе BLG шке фармакологический эффектыжым ончыкта?Ятыр ончычсо шымлымаш ончыктен, мом кӧргӧ микробиота тӱҥ рольым модеш патогенезыште UC, да микробиом-негызеш да микробиом-таргетинг терапий лектын, пеш оҥай стратегий семын эмлыме UC.Кызытсе шымлымашыште, ме ончыктен, мом BLG эмлыме лектышыш шуын, кӧргӧ составыште кугу вашталтышым темлена DSS-индуцированный колит ваштареш BLG-н аралыме эффектыже кӧргӧ микробиотым модулироватлыме дене кылдалтын. Тиде эскерымаш тыгай шонымаш дене келшен толеш: кӧргӧ микробиотын гомеостазшым перепрограммироватлымаш — ТКМ препарат-влакын пайдалыкыштым умылаш кӱлешан йӧн.36,37 Палемдыман, Аккермансия — грам-отрицательный да строго анаэробный бактерий, тудо слой слойышто ила кӧргӧ, тудо муцин-влакым локтылеш, пропионовый кислотам ыштен луктеш, кубок клетке-влакын дифференциацийыштым кумылаҥда да лышташым куча. барьер целостностьын функцийже.26 Шуко клинике да янлык данный-влак ончыктат, молан манаш гын, Akkermansia таза слизистой дене пеш кылдалтын,38 да пероральный администраций Akkermansia spp. ятырлан саемден кертеш слизистой воспаление.39 Мемнан кызытсе данный-влак ончыктат, молан манаш гын, относительный шуко Akkermansia ятырлан кугемын деч вара BLG эмлыме. Тидын деч моло, Prevotellaceae_UCG-001 SCFA-производство бактерий.27 Шуко шымлымаш ончыктен, мом Prevotellaceae_UCG-001 относительный шуко янлык дене относительный шуко муын колит.40,41 Мемнан кызытсе данныйна тыгак ончыкта, мом BLG эмлыме ятырлан кугемден кертеш относительный шуко Prevotellaceae_UCG-001 кок кишкыже DSS-обрабатыватлыше чыве.Вашталтыш, Oscillibacter мезофильный, строго анаэробный бактерий.42 увертарен, мом относительный шуко лийын Occillibacter UCG чыве-влак да IL-6 да IL-1β кӱкшытыштӧ да патологический балл дене ятырлан сай кылым кученыт.43,44 Палемдыман, BLG эмлымаш DSS-обрабатыватлыме чыве-влакын фекалийыштышт Oscillibacter-ын относительный шуко улмыжым ятырлан иземден. Палемдыман, тиде BLG-вашталтыме бактерий-влак эн SCFA-производитель лийыныт, ончычсо шымлымаш-влакын пайдале эффектыштым ончыктеныт. SCFAs ӱмбалне кӧргӧ воспаление да аралыме кӧргӧ эпителиальный целостность.45,46 Мемнан кызытсе данныйым тыгак эскерен, мом концентраций SCFA ацетат, пропионат, да бутират DSS-обрабатыватлыме фекалийыште чот кугемын BLG-обрабатыватлыше чыве.Пырля налын, тиде лектыш раш ончыкта, мом BLG эмлымаш эффектно DSS-induce кертеш Хронический рецидив колит дене черланыше чыве-влакын SCFA-влакым ыштен лукшо бактерийышт.
GLP-1 — тиде инкретин, тӱҥ шотышто илеум да кок кишкыште ыштен лукмо да пагарым эрыкташ да кочкыш деч вара вӱрыштӧ сакыр кӱкшытым волташ кӱлешан рольым модеш.47 Доказательстве-влак ончыктат: дипептидилпептидаза (DPP)-4, GLP-1 рецепторын агонистше, да GLP-1 наномедицине As-1841858 кӧргысӧ воспаленийым луштараш полшат. ончычсо шымлымашлаште ончыктымо почеш, кугу SCFA концентраций айдеме ден чыве-влакын плазме GLP-1 кӱкшытышт дене кылдалтын. 52 Мемнан кызытсе данныйна ончыкта, мом BLG эмлыме деч вара, шӧртньӧ GLP-1 кӱкшытыштӧ да Gcg мРНК экспрессий ятырлан кугемын. Тыгак, GLP-1 секреций ятырлан кугемын colonic культурышто BLG-эмлыме колит чыве-влак деч фекал экстракт дене кумылаҥдыме деч вара, DSS-эмлыме колит чыве-влак деч фекал экстракт дене кумылаҥдыме дене таҥастарымаште. GLP-1-ым лукмаш?Гвен Толхерст да молат. увертарен, мом SCFA кумылаҥден кертеш GLP-1 секреций гоч GRP43 да GPR41.29 Мемнан кызытсе данный-влак тыгак ончыктат, мом BLG эмлымаш ятырлан кугемда мРНК экспрессий GRP43 да GPR41 кок кишкыже DSS-обрабатыватлыше чыве.Тиде данный-влак ончыктат, мом BLG эмлымаш пӧртылтен кертеш SCFA-пропагандировать GLP-1 производствым активация GRP4441 да GPR41.
BLG — Китайыште кужу жаплан налме рецепт деч посна эм. Куньмин чыве-влакын BLG-н эн кугу чытыше дозыжо 80 г/кг, да нимогай пӱсӧ токсичностьым эскерен огытыл.53 Кызытсе жапыште айдемылан BLG-н (сакыр деч посна) темлыме дозыжо 9-15 г/кече (3 гана кечыште). Мемнан шымлымаш ончыктен: BLG 1g/DSS годым 80 г/кг колпсисым лушта чыве-влаклан.Тиде дозым клинике кучылталтше BLG дозым лишыл.Мемнан шымлымаш тыгак пален налын, тудын действий механизмже медиировать, кеч ик ужашыштыже, вашталтышым пуртымо дене кӧргӧ микробиота, рашемден SCFA-производство бактерий, кузе тыгай Akkermansia да Prevotellaceae_UCG-001, пӧртылташ манын, GLP-лектын GLP-производствым ыштен лукмаш 11GBL-лан шотлалтеш. умбакыже лончылаш, кузе клинике колит эмлыме эмлыме агент.Туге гынат, раш механизм, кудын дене тудо кӧргӧ микробиота модулировать кодеш, микробиота ситыдыме чыве да фекал бактерий трансплантаций пеҥгыдемдаш кодеш.
Туз, уксус кислота; но, масляная кислота; БЛГ, пандан; DSS, декстран натрий сульфат; DAI, чер активность индекс; ДПП, дипептидилпептидаза; FID, тул ионизаций детектор; F-Con, контроль чыве-влакын фекал экстрактышт; F-DSS, DSS колит чыве-влакын фекал экстрактышт; F-BLG, BLG дене эмлыме колит чыве-влакын фекал экстрактышт; GLP-1, глюкагон гай пептид-1; ГКГ, глюкагон; газ хроматографий, газ хроматографий; GRP43, G белок дене кылдалтше рецептор 43; GRP41, G белок дене кылдалтше рецептор 41; H&E, гематоксилин-эозин; HBSS, Хэнксын балансированный шӧр растворжо ; OTC, OTC; PCA, тӱҥ компонент анализ; PCoA, тӱҥ координат анализ; Про, пропионовый кислота; SASP, сульфасалазин; SCFA, кӱчык шинчыр коя кислота; Китай медицине, йӱла китай медицине; УК, язвенный колит.
Чыла экспериментальный протокол-влакым Пекин университетын Шэньчжэнь-Гонконг университетын шанче да технологий медицине рӱдержын (Шэньчжэнь, Китай) янлык этике комитетше институциональный йӧн да янлык правил-влак дене келшышын пеҥгыдемден (этике номер A2020157).
Чыла автор-влак концепцийлан да дизайнлан, данныйым погаш але данныйым лончылымашке да умылтарымашке кугу надырым пыштеныт; статьям возымаште але кӱлешан уш-акыл содержанийым критически тӧрлатымаште участвоватлен; рукописьым кызытсе журналыш пуаш келшен; адак версийым савыкташлан пеҥгыдемден; Пашан чыла шотыштат ответственный.
Тиде пашам Китайысе Национальный пӱртӱс шанче фонд (81560676 да 81660479), Шэньчжэнь университетын икымше классан проектше (86000000210), Шэньчжэнь шанче да технологий инноваций комитетын фондшо (JCYJ2021032409382010), да медицине да технологий провинций провинций Шымлымаш фонд (A2020157 да A2020272), Гуйчжоу медицине университетын аптеке Гуйчжоу провинцийыште тӱҥ лабораторий (YWZJ2020-01) да Пекин университетын Шэньчжэнь больницыже (JCYJ2018009) дене финансироватлалтеш.
1. Тан Б, Чжу Дж, Чжан Б, да молат.Терапевтический потенциалже триптолид противовоспалительный агент семын декстран натрий сульфат-индуцированный экспериментальный колит чыве.pre-immune.2020;11:592084.doi: 10.3389/fimmu.2020.2020.
2. Каплан Г.Г.ИБД-н тӱнямбал нелытше: 2015 гыч 2025 ий марте.Нат Рев Гастроэнтерол Гепатол.2015;12:720–727.doi: 10.1038/nrgastro.2015.150
3. Пэн Дж, Чжэн ТТ, Ли Сюэ, да молат.Кушкыл гыч лекше алкалоид-влак: перспективный чер модификатор-влак воспалительный кӧргӧ чер.Префармакология.2019;10:351.doi:10.3389/fphar.2019.00351
4. Сяо Хайтен, Пэн Цзе, Вэнь Б, да молат.Индиго Натуралис чыве-влакын DSS-индуцированный колитышт годым кӧргӧ оксидативный стрессым да Th1/Th17 вашмутым тормозитла.Oxid Med Cell Longev.2019;2019:9480945.doi: 10.1152/1989/4045
5. Чен М, Дин Ю, Тонг З. Эффективность да лӱдыкшыдымылык Sophora flavescens (Sophora flavescens) китай кушкыл медицине эмлыме годым язвенный колит: клинике доказательстве да потенциал механизм-влак.Префармакология.2020;11:603476.doi:10.3389/fphar.2020.603476
6. Цао Фан, Лю Цзе, Ша Бэнсин, Пан ХФ.Пӱртӱс продукт: экспериментально пайдале препарат-влак эмлыме воспалительный кӧргӧ чер.Curr Pharmaceuticals.2019;25:4893–4913.doi: 10.2174/1381612826616161524
7. Чжан C, Цзян М, Лу А. Йӱла китай медицине дене язвенный колитым адъювантный эмлыме нерген шонымаш. Клинический обзор аллергий иммунизаций.2013;44:274–283.doi: 10.1007/s12016-012-8328-9
8. Ли Чжунтен, Ли Ли, Чен ТТ, да молат.Сезонный гриппым эмлыме годым банланген гранулын пайдалыкше да лӱдыкшыдымылыкшо: рандомизированный тергымашлан шымлыме протокол.trial.2015;16:126.doi: 10.1186/s13063-015-064-x